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圓二色譜實(shí)驗(yàn)報(bào)告

2022-03-25 報(bào)告

  隨著人們自身素質(zhì)提升,報(bào)告的用途越來越大,不同種類的報(bào)告具有不同的用途。一聽到寫報(bào)告就拖延癥懶癌齊復(fù)發(fā)?下面是小編幫大家整理的圓二色譜實(shí)驗(yàn)報(bào)告,歡迎閱讀,希望大家能夠喜歡。

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>

  1、了解圓二色(cD)光譜的工作原理。

  2、學(xué)會(huì)運(yùn)用圓二色譜測(cè)氨基酸,蛋白質(zhì),DnA。

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  對(duì)R和L兩種圓偏振光吸收程度不同的現(xiàn)象。這種吸收程度的不同與波長(zhǎng)的'關(guān)系稱圓二色譜,是一種測(cè)定分子不對(duì)稱結(jié)構(gòu)的光譜法。圓二色光譜是一種差光譜,樣品在左旋偏振光照射下的吸收光譜與其在右旋吸收光譜照射下的偏振光之差。物質(zhì)的吸收光譜決定物質(zhì)的顏色。如果一個(gè)物質(zhì)對(duì)左旋偏振光和對(duì)右旋偏振光的吸收不同,那么稱該物質(zhì)具有圓二色性(circulardi2chroism,簡(jiǎn)稱cD)。同樣,如果一個(gè)物質(zhì)對(duì)于不同方向的線偏振光的吸收不同,那么該物質(zhì)具有線二色性。很多各向異性的晶體具有線二色性;而很多生物大分子和有機(jī)分子具有圓二色性在分子生物學(xué)領(lǐng)域中主要用于測(cè)定蛋白質(zhì)的立體結(jié)構(gòu),也可用來測(cè)定核酸和多糖的立體結(jié)構(gòu)。圓二色譜儀由光源、單色器、起偏器、圓偏振發(fā)生器、試樣室和光電倍增管組成。

  三、實(shí)驗(yàn)步驟

  1.通高純氮?dú)?5min后,開機(jī)

  2.點(diǎn)亮氙燈:打開主機(jī)電源InSTRUMEnTPoWER;打開氙燈電源XEnonLMAPPoWER;等待LMAPready燈亮;按紅色I(xiàn)GnITELMAP按鈕

  3.打開主板電源InSTRUMEnTPoWER

  4.打開Thermocubechiller(開關(guān)在冷卻器左邊)

  5.打開軟件,設(shè)置參數(shù),選擇數(shù)據(jù)保存設(shè)置;選擇保存位置;開始實(shí)驗(yàn),保存數(shù)據(jù)

  6關(guān)軟件TerminatecDSProgram中關(guān)閉

  7關(guān)氙燈電源XEnonLMAPPoWER

  8關(guān)閉Thermocubechiller

  9等待10min后關(guān)閉高純氮?dú)猓ǹ上刃邢率霾襟E)

  10清洗比色皿、注射泵及其他附件

  11光盤刻錄數(shù)據(jù)

  在蛋白質(zhì)分子中,肽鏈的不同部分可分別形成α-螺旋、β-折疊、β-轉(zhuǎn)角等特定的立體結(jié)構(gòu)。這些立體結(jié)構(gòu)都是不對(duì)稱的。蛋白質(zhì)的肽鍵在紫外185~240納米處有光吸收,因此它在這一波長(zhǎng)范圍內(nèi)有圓二色性。幾種不同的蛋白質(zhì)立體結(jié)構(gòu)所表現(xiàn)的橢圓值波長(zhǎng)的變化曲線──圓二色譜是不同的。α-螺旋的譜是雙負(fù)峰形的,β-折疊是單負(fù)峰形的,無規(guī)卷曲在波長(zhǎng)很短的地方出單峰。蛋白質(zhì)的圓二色譜是它們所含各種立體結(jié)構(gòu)組分的圓二色譜的代數(shù)加和曲線。因此用這一波長(zhǎng)范圍的圓二色譜可研究蛋白質(zhì)中各種立體結(jié)構(gòu)的含量。

  在上面兩幅圖中,圖b是圖a稀釋的到的,在上圖中,可看出在270~240nm之間有明顯的雙負(fù)峰,可推斷此物質(zhì)為蛋白質(zhì),且為α-螺旋結(jié)構(gòu)。

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