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醫(yī)學(xué)碩士開(kāi)題報(bào)告

2024-06-07 報(bào)告

  在人們?cè)絹?lái)越注重自身素養(yǎng)的今天,報(bào)告使用的次數(shù)愈發(fā)增長(zhǎng),不同種類(lèi)的報(bào)告具有不同的用途。那么,報(bào)告到底怎么寫(xiě)才合適呢?下面是小編幫大家整理的醫(yī)學(xué)碩士開(kāi)題報(bào)告,供大家參考借鑒,希望可以幫助到有需要的朋友。

  一、立題依據(jù)(科學(xué)意義及國(guó)內(nèi)外現(xiàn)狀分析及參考文獻(xiàn))

  惡性黑色素瘤是一種高度惡性且侵襲性的癌之一,多發(fā)生于皮膚,早期發(fā)生血行轉(zhuǎn)移。對(duì)放、化療不敏感,在世界范圍內(nèi)發(fā)病率增高,人們一直在期待著可以征服惡性黑素瘤的新的療法的出現(xiàn)!

  最近大量的數(shù)據(jù)表明惡性腫瘤的發(fā)展與T—鈣粘蛋白的表達(dá)變化相關(guān)、T—鈣粘蛋白已在乳腺癌、前列腺癌、肝癌、肺癌[1—3] 、胃癌、胰腺癌、卵巢癌[4—9]等多種惡性腫瘤中被檢測(cè)到表達(dá)減少、最近的研究表明T/H—鈣粘蛋白在乳腺癌中的重新表達(dá)能抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),降低體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞的侵襲潛能[1]、T/H—鈣粘蛋白這個(gè)新型鈣粘蛋白分子在人類(lèi)許多癌細(xì)胞中表達(dá)都降低表明它或許在腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[10]及維持正常細(xì)胞的表型中起重要作用[11]、T/H—鈣粘蛋白與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著密切的聯(lián)系,也許它會(huì)為腫瘤的診斷和治療帶來(lái)新的契機(jī)、T—鈣粘蛋白是否對(duì)惡性黑色素瘤也有作用,目前還沒(méi)有相關(guān)研究的報(bào)道,所以本實(shí)驗(yàn)將進(jìn)行相關(guān)方面的探討性研究!

  二、研究?jī)?nèi)容及預(yù)期成果(說(shuō)明具體研究?jī)?nèi)容、創(chuàng)新點(diǎn)及擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題、預(yù)期成果及提供形式)

  研究?jī)?nèi)容:

  第一部分:正常表皮組織、痣細(xì)胞及黑色素瘤細(xì)胞中T—cadherin表達(dá)情況

  第二部分T—cadherin基因克隆和真核表達(dá)載體的構(gòu)建

  第三部分:T—cadherin基因的真核表達(dá)及生物活性分析

  創(chuàng)新點(diǎn):首次將T—cadherin基因轉(zhuǎn)染黑素瘤細(xì)胞

  擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題:通過(guò)RT—PCR反應(yīng)擴(kuò)增出T—cadherin的基因全長(zhǎng)。

  預(yù)期成果及提供形式:

  觀察T—鈣粘蛋白在正常皮膚組織細(xì)胞、痣細(xì)胞及黑色素瘤細(xì)胞中的表達(dá)情況!

  進(jìn)一步闡明T—鈣粘蛋白作用機(jī)制

  T—鈣粘蛋白基因轉(zhuǎn)染入黑色素瘤細(xì)胞后觀察對(duì)其增殖和轉(zhuǎn)移活性的抑制情況,探索臨床診斷和治療黑色素瘤及其它腫瘤的方法!

  三、研究方案(包括研究方法、技術(shù)路線、研究進(jìn)度安排)

  研究方法:

  第一部分:正常表皮組織、痣細(xì)胞及黑色素瘤細(xì)胞中T—cadherin表達(dá)情況

  免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)

  1、材料:從正常人皮膚切取的痣組織,人黑色素瘤細(xì)胞株

  2、主要試劑和溶液

 。1)第一抗體:兔抗人T—cadherin抗體

  (2)第二抗體:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG

 。3)“三抗”:鏈親和霉素標(biāo)記HRP

  3、設(shè)備

  4、方法

 。1)冷凍切片的免疫染色程序

  (2)活細(xì)胞的免疫染色程序

  5、熒光顯微鏡檢

  注意:為保證結(jié)果的可靠性應(yīng)該同時(shí)設(shè)有對(duì)照

  陽(yáng)性對(duì)照(正常組織);

  陰性對(duì)照(PBS代替一抗)以證明抗體的特異性。

  第二部分T—cadherin基因克隆和真核表達(dá)載體的構(gòu)建

  1、材料:

  (1)組織和細(xì)胞

 。2)菌株與質(zhì)粒

  (3)工具酶

 。4)試劑

  (5)儀器

  2、方法

 。1)引物的設(shè)計(jì)

 。2)總RNA的提。寒惲蚯杷犭摇印确鲁樘嵋徊椒

 。3)甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳分析其質(zhì)量,觀察所提RNA有無(wú)明顯降解;

  (4)逆轉(zhuǎn)錄RT反應(yīng):為了證實(shí)RT反應(yīng)的成功設(shè)管家基因GAPDH為內(nèi)對(duì)照

 。5)PCR擴(kuò)增:利用上下游引物,在DNA聚合酶下對(duì)目的片段進(jìn)行擴(kuò)增,PCR過(guò)程設(shè)β—actin為內(nèi)對(duì)照

 。6)PCR產(chǎn)物的回收、純化

 。7)PCR產(chǎn)物的克隆

 。8)DNA序列測(cè)定

  (9)真核重組表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建

 。10)陽(yáng)性重組質(zhì)粒的鑒定和篩選

  (11)質(zhì)粒的大量提取

 。12)轉(zhuǎn)染黑色素瘤細(xì)胞

  第三部分:T—鈣粘蛋白基因的真核表達(dá)及生物活性分析

  1、材料

  2、方法

  (1)轉(zhuǎn)染細(xì)胞的培養(yǎng)

 。2)Western印跡法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后蛋白的表達(dá)

  (3)流式細(xì)胞周期分析

 。4)凋亡的檢測(cè)

  技術(shù)路線圖:

  研究進(jìn)度安排:

  20xx、9——20xx、7學(xué)習(xí)學(xué)位課程,查閱文獻(xiàn),完成課題設(shè)計(jì)

  20xx、9——20xx、9基本完成實(shí)驗(yàn)研究工作

  20xx、10——20xx、3完成實(shí)驗(yàn)補(bǔ)遺工作并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,撰寫(xiě)論文

  20xx、4——20xx、6論文答辯

  四、經(jīng)費(fèi)預(yù)算

  試劑費(fèi)用:15000元組織及細(xì)胞:1000元

  文獻(xiàn)資料費(fèi):500元

  論文打印費(fèi):1000元

  答辯費(fèi):1500元

  總計(jì):19000元

  五、課題可行性分析

  實(shí)驗(yàn)在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行,導(dǎo)師段昕所教授、主任醫(yī)師對(duì)黑色素瘤的診斷治療、檢測(cè)方法和研究進(jìn)展有深入的了解,對(duì)本課題的研究設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)有重要的指導(dǎo)意義。

  已完成黑色素瘤及T—鈣粘蛋白研究最新進(jìn)展的文獻(xiàn)檢索和綜述報(bào)告工作。

  所有實(shí)驗(yàn)均在承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院皮膚病研究室和中心實(shí)驗(yàn)室完成。實(shí)驗(yàn)室的老師實(shí)驗(yàn)技術(shù)熟練,在細(xì)胞培養(yǎng)、免疫組化及分子生物學(xué)等方面都可給予指導(dǎo);實(shí)驗(yàn)所需的科研儀器設(shè)備實(shí)驗(yàn)室均具備。

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